1ère édition des journées RESAMA (2016, Ile-de-France)
Formation initiale et continue
Formation expérimentation animale modèles aquatiques CNRS niveau Concepteur et Réalisateur. Réglementation
(20 min)Ivan Balansard (CNRS CE2FPrim, Marseille)Présentation de l’AFSTAL
(20 min)Sébastien Paturance (CNRS TAAM, Orléans)Présentation de la Licence Professionnelle Aquaculture Continentale et Aquariologie, intérêt des aquariophiles pour le monde de la recherche
(20 min)Fabrice Teletchea (Université de Lorraine, Vandoeuvre-lès-Nancy)Formations expérimentation animale espèces aquacoles d'Oniris, Nantes (Niveaux concepteur (1), praticien (2) et chirurgie expérimentale)
(20 min)Jean-Claude Desfontis (Oniris, Nantes)
Points limites
Introduction, les points limites en expérimentation animale
(15 min)Franck Baron (Clinique vétérinaire du Pont de Seine)Qu’est-ce-qu’un poisson malade ? Qu’est-ce qu’un amphibien malade ?
(15 min)Emmanuel Leguay, Emmanuel Meunier (Vetofish)Les points limites chez les poissons et amphibiens modèles : quels sont les signes de mauvaise santé et/ou de douleur chez nos animaux
(30 min)Table ronde
Présentations courtes Animaleries
CRB Rennes [Xénope]
(10 min)Brigitte Guillet (Université Rennes 1)ICM-UPMC [Xénope]
(10 min)Abdelkrim Manoui (UPMC)NeuroPSI-SCAnR [Xénope]
(10 min)Albert Chesneau (CNRS)ICM [Poisson-zèbre]
(10 min)Sophie Nunes-Feguereido (ICM)ENS Paris [Poisson-zèbre]
(10 min)Virginie Candat (ENS)AMAGEN [Poisson-zèbre] [Médaka]
(10 min)Naïma El Khallouki (CNRS/INRA)IGFL-PRECI [Poisson-zèbre] [Autres]
(10 min)Sandrine Bretaud (UCBL)Institut Curie [Poisson-zèbre]
(10 min)Virginie Dangles-Marie (Curie)Institut Pasteur Paris [Poisson-zèbre]
(10 min)Valérie Briolat (Pasteur)UPMC [Poisson-zèbre]
(10 min)Isabelle Anselme (UPMC)
RESAMA
Les structures amphibiens modèles
(15 min)Brigitte Guillet (Université Rennes 1)Les structures poissons modèles
(15 min)Laurent Legendre (CNRS)Résultats de l’étude sanitaire
(30 min)Emmanuel Leguay – Emmanuel Meunier (Vetofish)
2ème édition des journées RESAMA (2017, Ile-de-France)
Alimentation
A pneumatic dispenser for fast delivery of fish food - Un distributeur rapide d’aliment sec poisson à air comprimé (in english)
(15 min)Francesco Argenton, University of Padova, ItalieDéveloppement des techniques de nourrissage de l'animalerie AMAGEN chez l'espèce Danio rerio
(15 min)Marion Dalles-Axel Duchène, UMS AMAGEN CNRS-INRA, Gif-sur-Yvette
Perfectionnement des méthodes de nourrissage poissons-zèbre à l’animalerie de l’ENS Paris
(15 min)Firas Bouallague, ENS ParisStratégie alimentaire sur l’animalerie xenope de l’équipe SCaNR-CERTO
(15 min)Odile Bronchain, NeuroPSI, U-PSud, U-PSaclayStratégie alimentaire au CRB Xenope
(15 min)Brigitte Guillet, Université Rennes1 CRB XenopeDomestication des poissons: prise en compte des facteurs biotiques et abiotiques
(25 min)Sylvain Milla, Université de Lorraine, NancyL'impact des pratiques alimentaires et de la nutrition sur la santé des animaux aquatiques
(25 min)Emmanuel Meunier, Vetofish, Martigues
Types d’aliments utilisés par les structures poissons et amphibiens visitées par RESAMA
(25 min)Laurent Legendre (UMS AMAGEN) et Brigitte Guillet (Université Rennes1, CRB Xenope)
Pathologies
4 monographies de pathologies des poissons et amphibiens modèles (Pseudoloma neurophilia, Mycobacterium sp., Pseudocapillaria sp., Aeromonas sp.)
(25 min)Emmanuel Meunier, Vetofish, MartiguesEtude de la prévalence et de la transmission des opalines chez les xénopes
(25 min)Nicolas Pollet, EGCE, CNRS-U-PSud-IRD, Gif sur YvetteIntérêt de l'autopsie et de l'histopathologie en ichthyopathologie
(25 min)Sophie Labrut, LHA ONIRIS, Nantes
Présentations courtes Animaleries
UR 1037 LGPG INRA, Rennes [Poisson-zèbre] [Médaka] [Autres]
(8 min)Amélie Patinote (UR 1037 LGPG INRA, Rennes)UMR7288 IBDM CNRS, Marseille [Xénope]
(8 min)Florian Roguet (UMR7288 IBDM CNRS, Marseille)Institut Curie, Paris [Poisson-zèbre]
(8 min)Armelle Halle (Institut Curie, Paris)
Divers
Présentation du site resama.eu et de ses développements, partie privée et partie publique
(10 min)Emmanuel Meunier, Vetofish, MartiguesPrésentation de la ComAqua/AFSTAL
(10 min)Brigitte Guillet, CRB Rennes
3ème édition des journées RESAMA (2018, Ile-de-France)
Zootechnie
Présentation de l'infrastructure EMBRC-France et des élevages (vertébrés et invertébrés) des 3 Stations Biologiques Marines
(35 min)Gaëtan Schires, Pascal Romans, Nathalie Turque, Régis Lasbleiz, EMBRC-FranceL’Infrastructure de Recherche nationale EMBRC-France a pour objectif d’offrir et faciliter l’accès aux écosystèmes et à leurs ressources marines des 3 stations qui la composent (Station Biologique de Roscoff SBR, Institut de la Mer de Villefranche IMEV, et l’Observatoire Océanologique de Banyuls OOB), ainsi qu’à un environnement technologique de haut niveau.
EMBRC-France à travers la mise en place d’un CRB multi-sites, intègre les expertises zootechniques, les savoir-faire pour la mise à disposition d’organismes marins sauvages (collectes) ou d’élevage. Les responsables des services aquariologiques, Régis Lasbleiz (IMEV), Pascal Romans (OOB) et Gaëtan Schires (SBR) détailleront les infrastructures aquariologiques de leur site et les innovations zootechniques développées sur les espèces d’intérêt.Calcul du taux de mortalité pour l’espèce poisson-zèbre
(20 min)Marion Dalles, UMS AMAGEN CNRS-INRA, Gif-sur-YvetteDans le milieu aquacole, il est très classique et habituel de mettre en place un suivi de mortalité rigoureux sur les élevages piscicoles. Ce suivi est important pour détecter, comprendre et améliorer les difficultés rencontrées sur les différentes phases du cycle de vie des animaux.
Cela s'adapte également à l'animalerie de recherche et permet d’améliorer le bien-être des animaux et de mieux répondre à la réglementation sur l’expérimentation animale.Amélioration zootechnique d’un élevage de xenopes (croissance des têtards aux adultes, feuilles de suivi de pontes, tri des juvéniles, …)
(20 min)Brigitte Guillet, CRB Xenope, RennesDepuis 4 ans maintenant le CRB change ses pratiques d'entretien, de production, de conduite d'élevage, de gestion de production sur l'animaerie xenopus laevis pour améliorer de façon qualitative et quantitative l'efficacité de production, ceci en révisant principalement: la densité d'élevage, l'alimentation, la gestion de production.
En conséquence, les résultats sont quantifiables: les taux de perte entre les stades bourgeons caudaux/métamorphosés et métamorphosés/adultes ont été divisés par 2, et, morphologiquement, les animaux retrouve un IMC intéressant (gain en taille 10% et poids 35%).Comment mettre en place le suivi de mortalité avec le document d’enregistrement RESAMA
(20 min)Emmanuel Meunier, Vetofish, Châteauneuf-lès-MartiguesLe suivi des mortalités en animalerie de recherche est un indicateur certes chronophage mais qui permet quand il est bien mené, d'appréhender toute dérive zootechnique et d'améliorer le statut sanitaire global de la structure. Conscient des contraintes liées à ce suivi précis, RESAMA a souhaité apporter à la communauté un outil simple (formulaire PDF), pertinent (catégorisation des mortalités et des euthanasies), qui permette également un archivage et un partage anonyme sur le site internet RESAMA.
Zoonoses
Les zoonoses aquatiques, risque de zoonoses, contexte des animaleries aquatiques de recherche, et dans le milieu naturel, point de vue de la médecine humaine et de la santé au travail.
(30 min)Dr Gaëtan Deffontaines, Médecin du travail - conseiller technique national Risques biologiques et zoonoses (Caisse Centrale de la Mutualité Agricole), BobignyDans nos pays occidentaux, la plupart des zoonoses humaines sont devenus rares. La surveillance sanitaire des animaux, de l’alimentation, des systèmes performants de veille en santé animale et humaine, la promotion de l’hygiène, l’offre de soins permettent d’y maintenir un équilibre qui nécessite toujours une vigilance et une énergie permanente. Concernant les aquariums, certaines mycobactéries environnementales (M. marinum, plus rarement M. fortuitum, ...) dont le réservoir peut être autant le poisson que son environnement peuvent provoquer des infections cutanées locales trainantes suite à l’inoculation de plaies même minimes. Rarement, l’infection peut atteindre les tendons ou l’articulation sous-jacente. Chez les personnes immunodéprimées, l’infection peut se disséminer notamment dans les ganglions ou les poumons. La prévention repose sur une évaluation du risque et la connaissance des maillons de la chaîne de transmission de l’agent pathogène : surveillance sanitaire des réservoirs animaux potentiels, gestion du nettoyage des aquariums, respect des règles d’hygiène, protection individuelle (notamment gant étanche à manchette, gestion des tenues de travail), information et prise en compte de l’état de santé de chaque personne.
Symptômes des potentielles zoonoses sur les poissons et les amphibiens dans les animaleries de recherche
(30 min)Emmanuel Leguay – Emmanuel Meunier Vetofish, Châteauneuf-lès-MartiguesSymptômes des potentielles zoonoses sur les poissons et les amphibiens dans les animaleries de recherche : Après un bref rappel des zoonoses majeures en animalerie de recherche, les résultats des détections de mycobactéries dans le cadre de RESAMA ont été présentés (par espèce cible, par pathogène, par technique).
Parmi toutes les mycobactéries identifiées, il s'avère que Mycobacterium fortuitum représente 15% des échantillons positifs en PCR chez les poissons, et 5% pour M. marinum. Chez les xénopes, M. marinum est présent dans 55% des échantillons positifs. Un diaporama photographique de principaux signes cliniques chez des poissons atteints de mycobactériose a ensuite été présenté.Gestion sanitaire dans les animaleries aquatiques : comment faire concrètement
(30 min)Laurent Legendre (UMS AMAGEN) et Brigitte Guillet (CRB Xenope)Pour assurer santé, bien -être aux animaux mais aussi aux utilisateurs/manipulateurs d'animaux il est important d'opérer une gestion sanitaire des animaleries. Cette gestion est basée sur la recherche des pathogènes (suivi des animaux) et la mise en place d'actions préventives et curatives en vue de stopper ou de limiter l'émergence de maladies (désinfection, quarantaine...). 3 leviers d'actions sont possibles: le réservoir, le mode de transmission et l'hôte réceptif.
Méthodes de dépistage des maladies surveillées dans le cadre du réseau RESAMA
(30 min)Nicolas Keck, Directeur Laboratoire Départemental Vétérinaire de l’HéraultLe choix des méthodes de laboratoire utilisées dans le cadre d’un réseau de surveillance dépend de plusieurs facteurs qui concernent notamment les caractéristiques des agents pathogènes recherchés (diversité, paramètres biologiques, prévalence etc.), les caractéristiques intrinsèques et extrinsèques des méthodes, la robustesse des méthodes et les aspects financiers. Au travers d’exemples liés au diagnostic bactériologique en général et au dépistage des infections par les mycobactéries non tuberculeuses ou par Pseudoloma neurophilia, la présentation expose les différentes méthodes ou combinaisons de méthodes utilisées dans le cadre du réseau RESAMA. Les analyses bactériologiques consistent ainsi en un ensemencement direct sur différents milieux, sélectifs ou non de certains genres bactériens, puis un antibiogramme par diffusion. Le dépistage des infections par les infections non tuberculeuses consiste en l’association d’une méthode PCR TaqMan très sensible ciblant le gène de la protéine hsp65, suivie d’un génotypage et d’un séquençage si nécessaire. Le dépistage des infections par Pseudoloma neurophilia consiste en une PCR TaqMan basée sur la littérature et des méthodes d’extraction adaptées des acides nucléiques. Ces analyses sont réalisées dans le cadre de la démarche qualité du laboratoire. Les résultats doivent être interprétés en fonction des données du terrain, ainsi que des résultats obtenus par d’autres méthodes (notamment l’histologie).
Analyses histologiques des échantillons (animaux, tissus) dans le cadre des analyses RESAMA
(30 min)Emmanuel Leguay, Vetofish, Châteauneuf-lès-MartiguesAnalyses histologiques des échantillons (animaux, tissus) dans le cadre des analyses RESAMA :
Après avoir exposé les contraintes et les techniques liées à la préparation des échantillons pour analyse histologique, un diaporama photographique des principales affections infectieuses ou non, rencontrées lors des visites RESAMA a ensuite été présenté. L'histologie demeure un outil indispensable au bon suivi de santé des poissons et amphibiens et permet un dépistage large des différents agents pathogènes mais également de quantifier l'intensité des lésions anatomopathologiques induites.
Présentations courtes Animaleries
IRSN de Cadarache (laboratoire d'écotoxicologie des radionucléides) [Poisson-zèbre]
(15 min)Béatrice Gagnaire/Olivier Simon (IRSN, PSE-ENV/SRTE LECO, Centre d'Études Nucléaires de Cadarache, Saint-Paul-Lez-Durance)La présentation a pour but de présenter les dispositifs existants à l'IRSN de Cadarache (au laboratoire d'écotoxicologie des radionucléides) en ce qui concerne les élevages poisson (poisson-zèbre Danio rerio et carpe Cyprinus carpio) ainsi que les dispositifs expérimentaux permettant l'irradiation des poissons.
Installations expérimentales Ineris - Unité Écotoxicologie in vitro et in vivo [Poisson-zèbre] [Épinoche]
(15 min)Cyril Turies (INERIS, Verneuil-en-halatte)Les installations expérimentales sur les modèles poissons de l’Ineris contribuent à la prévention des risques pour l’environnement par l’étude des mécanismes d’action des perturbateurs endocriniens et la mise en œuvre d’outils de biosurveillance des milieux aquatiques. Les modèles étudiés sont le poisson zèbre et l’épinoche à 3 épines avec des systèmes permettant d’évaluer l’écotoxicité des substances chimiques, du niveau individuel jusqu’au niveau populationnel en mésocosme.
Système fait maison de mesures permanentes des paramètres environnementaux dans une animalerie poisson
(15 min)Virginie Candat (ENS,IBENS, Paris)La stabilité des paramètres de l’eau et de l’environnement (lumière, température, pH, circulation de l’eau, etc.) est essentielle pour maintenir le poisson zèbre dans des conditions saines et pour obtenir une large production d’œufs. Ainsi, les animaleries poissons zèbre devraient disposer d’un système d’alarme automatique pouvant informer les utilisateurs si l’un de ces paramètres est en dehors des seuils acceptables. Il existe des systèmes commerciaux, mais ils sont souvent très coûteux et difficiles à adapter aux besoins de chaque installation. Pour résoudre ce problème, nous avons développé un système d'alarme sur mesure basé sur un processeur Raspberry Pi et une carte Arduino qui mesure en permanence la lumière, la température, l'humidité, le débit d'eau, le volume d'eau, le pH, l'oxygène dissous et la conductance de l'eau. Tout écart par rapport aux seuils préétablis génère une alarme par mail envoyée aux responsables de l’animalerie. Le code est écrit en Python et est open source. Les données acquises sont enregistrées dans une base de données PostgreSQL. Les données enregistrées sont ensuite visualisées via une page Web écrite en php à l'aide de la bibliothèque jpgraph. Nous mettons à disposition toute la documentation et les codes.
UMR7221 Evolution des Régulations Endocriniennes MNHN-CNRS, Paris [Poisson-zèbre] [Xénope]
(15 min)Laurent Coen (UMR7221 Evolution des Régulations Endocriniennes MNHN-CNRS, Paris)Présentation des installations et du fonctionnement de l’animalerie aquatique de L’UMR7221 du MNHN (laboratoire « Evolution des régulations endocriniennes »). L’animalerie aquatique, d’une surface de 230 m2, héberge plusieurs espèces d’amphibiens (Xenopus laevis, Xenopus tropicalis, Ambystoma mexicanum) et une espèce poisson (Danio rerio).
UMR3738 Zebrafish Neurogenetics, Pasteur, Paris [Poisson-zèbre]
(15 min)Sébastien Bedu (UMR3738 Zebrafish Neurogenetics, Pasteur, Paris)Le poisson-zèbre ZEN, présentation d’une animalerie de poissons-zèbre pour l’équipe de recherche ZEN (ZEbrafish Neurogenetics) dirigée par Laure Bally-Cuif. L’équipe ZEN utilise ce modèle animal pour étudier le fonctionnement des cellules souches neurales.
4ème édition des journées RESAMA (2019, Montpellier)
Modèles marins
Développement de modèles invertébrés marins pour l’innovation biomédicale
(25 min)Eric Röttinger, IRCAN, CNRS UMR 7284 - INSERM U1081 - Université Côte d’Azur, NiceAfin d’étudier les capacités extrêmes de réponse aux stress, de régénération et de longévité au sein de l’IRCAN, nous avons mis en place un plateau expérimental aquatique marin. Chez plusieurs espèces de cnidaires, anémones de mer et coraux, nous avons optimisé leurs conditions de culture en milieu contrôlé. Ceci nous a permis non seulement de réduire leur mortalité et d’augmenter leur taux de reproduction, mais également de raccourcir leur cycle de vie afin de lever des verrous dans le développement d’approches de génie génétique.
Comment des mollusques sont devenus « sensibles » au regard de la législation ?
(25 min)Ludovic Dickel, UMR EthoS, Université de Caen Normandie (Visioconférence)Cette présentation tentera d’expliquer pourquoi et comment les citoyens, les experts et le législateur européen, par la Directive 2010/63/UE en sont arrivés à s’intéresser aux céphalopodes. Elle fera un rapide état des lieux de la recherche sur ces animaux en Europe. En s’appuyant sur quelques études de cas, elle soulignera certaines difficultés que peut rencontrer le chercheur dans l’application de la règlementation actuelle, celle-ci étant essentiellement basée sur les modèles vertébrés.
Les Céphalopodes en expérimentation animale, le cas de Sepia officinalis
(25 min)Gaëtan Schires, EMBRC-France, RoscoffLes céphalopodes sont des animaux aux facultés d’adaptation impressionnantes, possédant le cerveau le plus volumineux et le plus complexe de tous les invertébrés. Ils présentent tout un éventail de comportements complexes et très élaborés. En laboratoire, les seiches sont plus utilisées que les calmars et les pieuvres, plus difficiles à élever. La maintenance de ces animaux en milieu confiné pose de nombreuses questions éthiques et relevant du bien-être animal. En effet, au même titre que les vertébrés, les céphalopodes sont soumis à la directive 2010/63/UE.
L’absence de cadre (zootechnique et éthologique) ne permet pas d’évaluer efficacement l’impact des projets déposés sur les céphalopodes. La production de répertoires comportementaux spécifiques avec des items précis devrait permettre à terme une meilleure prise en compte de la souffrance des céphalopodes en expérimentation.
Général
Zebrafish welfare, health and AAALAC accreditation at NHRI zebrafish resource center (in english)
(25 min)Dr May-Su YOU, NHRI zebrafish resource center, Zhunan, TaiwanTaiwan Zebrafish Core Facility at NHRI, TZeNH (National Health Research Institutes) is a national zebrafish stock center. The facility contains water centralized-circulating housing system where lighting, temperature, water quality are controlled, tanks are bio-coded and daily operation is performed according to SOPs and regulated by the veterinary of NHRI. The facility encompassed around 1200 fish tanks in 120 m2 surface area and with a total fish number around 30,000. It's an AAALAC accredited animal since March 2015.
To ensure the wellbeing of experimental zebrafish the facility user needs to be trained prior access to the facility. Fish welfare has been the first priority of the facility daily operations, including establishing a fish health monitoring system, implementing good practice of husbandry, environmental control (macro- and micro-) anesthesia and euthanasia and executing“3R” principle in writing animal protocols.
Through providing basic and advanced training workshops TZeNH also serves as a training center to promote the proper usage of zebrafish and help the community to establish the “good practice” based on international standards The ultimate goal of TZeNH is to facilitate the zebrafish research excellence of Taiwan.
Les recommandations FELASA concernant l’hébergement et l’élevage des poissons-zèbre
(25 min)Frédéric Sohm, UMS AMAGEN CNRS-INRA, Gif-sur-Yvette
Un groupe d'Expert (cf. Laboratory Animals 2019, Peter Aleström, Livia D’Angelo, Paul J Midtlyng, Daniel F Schorderet, Stefan Schulte-Merker, Frederic Sohm and Susan Warner) mandaté par le FELASA et EuFishBioMed ont rédigé des recommandations pour l'élevage des poissons-zèbres. Ces recommandations visent à fournir un socle commun minimal pour l'élevage des poissons-zèbres aux laboratoires européens. Elles fournissent également une base sur laquelle le dialogue entre les responsables d'animaleries, les membres des SBEA et les inspecteurs vétérinaires pourra s'appuyer.
Les manipulations des animaux modèles aquatiques, comment améliorer le bien-être
(25 min)Emmanuel Leguay, Vetofish, Châteauneuf-lès-MartiguesComme pour les animaux terrestres, la manipulation des animaux aquatiques peut être à l'origine de stress, d'angoisse et de blessure. Dans certaines limites, ils peuvent être acclimatés aux manipulations. Cependant à la différence des animaux terrestres, leur milieu de vie dans lequel ils évoluent est bien distinct du nôtre. Ils ont développé des sensibilités et des adaptations biologiques et physiologiques qu'il est primordial de prendre en compte. Nous aborderons les particularités des milieux aquatiques et de ses espèces, pour mieux appréhender leurs particularités sensibles, et par des exemples concrets illustrer des pistes de raffinements applicables lors de manipulations (capture, transport, contention).
Présentation du Réseau National des SBEA (Structures du Bien-Être Animal)
(10 min)Karim Mesbah, IGF-IGH, CNRS, MontpellierUn réseau national des structures chargées du bien-être animal se met en place sous l'égide de l'AFSTAL, du GIRCOR et de l'OPAL. Ce réseau se donne pour mission i) d'être une source d'informations pour les SBEA, ii) d'être un lieu d'échange et de partage, iii) d'organiser des formations iV) de coordonner, rassembler et partager V) de travailler sur les relations SBEA et comité d’éthique.
Pathologies
Biodiversité, des parasites et des xénopes : résultats d’une étude par séquençage metabarcoding sur X. tropicalis (en élevage) et d’autres espèces de populations naturelles
(25 min)Nicolas Pollet, CNRS EGCE, Gif-sur-Yvette (Visioconférence)Les parasites retrouvés chez les xénopes sont nombreux et taxonomiquement très divers, comme souvent chez les amphibiens. Les protistes parasites sont difficiles à étudier et c’est pourquoi nous avons entrepris une étude dans laquelle nous avons cherché à recenser les protistes retrouvés chez différentes espèces de xénopes d’afrique centrale, tout en incluant des Xenopus tropicalis élevés en animalerie de laboratoire. Nous avons recherché les formes libres et les formes parasites dans cinq espèces de xénopes, tant chez l’adulte que le têtard, par une approche de séquençage à partir d’échantillons de tubes digestifs. Nous présentons les résultats de ce séquençage, ainsi que la composition en protistes en nous focalisant sur les parasites : coccidies, grégarines, microsporidies, ichthiosporea etc. En règle générale, la prévalence de ces parasites est importante et révèle une importante perméabilité entre l’environnement aquatique et la faune parasitaire des xénopes. Une majorité des protistes est partagée entre différentes espèces sympatriques ou parapatriques. Les animaux issus d’élevage sont très faiblement porteurs de parasites en comparaison à la faune sauvage.
Bilan des résultats des visites sanitaires RESAMA sur la période 2012-2019
(25 min)Emmanuel Meunier, Vetofish, Châteauneuf-lès-Martigues
Depuis la dernière présentation en 2016 des résultats des analyses menées dans le cadre de RESAMA, le nombre d'animaux échantillonnés a doublé, de nouvelles espèces de poissons ont été examinées conduisant à de nouvelles détections de pathogènes. Cette présentation actualise les taux de détection des principaux agents pathogènes, révèle l'évolution de la prévalence de Pseudoloma et de Mycobacterium par classe d'âge, et apporte un focus sur certaines parasitoses rencontrées les xénopes.
Présentations courtes Animaleries
IGF, équipe MMR, CNRS Montpellier [Poisson-zèbre]
(10 min)Adèle Faucherre (IGF, équipe MMR, CNRS, Montpellier)La nouvelle zone d’hébergement pour poissons-zèbres a été mise en place sur le campus Arnaud de Villeneuve au printemps 2018. Elle se compose de 2 systèmes indépendants comprenant 10 portoirs d'hébergement et un portoir de génotypage. Les larves/alevins sont nourris à l'aide de rotifères dans des bacs séparés d'environ 4 à 15-20 jours post fécondation puis sont rentrés dans les systèmes où l’alimentation s'effectue avec de la nourriture sèche.
CRBM CNRS, Montpellier [Xénope]
(10 min)Thierry Lorca (CRBM CNRS, Montpellier)L’animalerie aquatique de la route de Mende abrite 2500 poissons zebrafish et 450 Xenopus Laevis. Sept équipes de recherche utilisent ces animaux comme modèle d’étude principal. Les pontes issues de ces deux espèces sont récupérées et utilisées pour l’expérimentation.
VBMI, Inserm, Université Montpellier, Nîmes [Poisson-zèbre]
(10 min)Annette Vergunst (VBMI, Inserm, Université Montpellier, Nîmes)L’animalerie poissons-zèbre sur le campus UFR de Médecine site Nîmes a un système d’hébergement indépendant avec 500 poissons. La pièce est éclairée avec des tubes néon « lumière du jour ». Concernant la maintenance des lignées de poissons, les larves de moins de 3 jours sont directement élevées dans le système et nourri à partir de J5 avec une nourriture sèche riche en protéine, puis après J10 avec des Artémias en ajout de la nourriture sèche. Les œufs sont récupérés et utilisés pour l’expérimentation.
U1198, équipe MMDM, Inserm, Université Montpellier, UMR 5235 LPHI, Montpellier [Poisson-zèbre]
(10 min)Mireille Rossel – Catherine Gonzalez (U1198, équipe MMDM, Inserm, Université Montpellier, UMR 5235 LPHI, Montpellier)Première animalerie créée à l’université de Montpellier en 1996, c’est une structure commune pour deux unités de recherche: LPHI Étude des relations Hôte/ Pathogènes et MMDN Étude des maladies neurodégénératives. Ses caractéristiques: équipée uniquement de stand-alone et nourrissage avec Tetrahymena, dès 5 jours.
Divers
Bilan et méthodologie du marquage RFID chez Xenopus laevis au CRB Xenopes
(10 min)Brigitte Guillet, CRB Xenopes, Rennes (Visioconférence)
L'arrêté du 8 octobre 2018 oblige à un marquage de tous les animaux non domestiques détenus en captivité. Les Xenopes, animaux de la faune sauvage, sont concernés par cette réglementation qui impose un marquage à l'aide de transpondeur RFID. La plateforme CRB Xenopes rencontre des difficultés à ce niveau car les transpondeurs implantés sont perdus au cours du temps, ce à un délai variable post installation de la puce. Nous faisons ici un bilan sur les différents protocoles qui ont été testés comme le lieu d'implantation, la taille du transpondeur, la méthodologie, et les pistes de travail.
5ème édition des journées RESAMA (2022, Paris)
Hors session
Éthologie sonore chez les cichlidés, en particulier Maylandia zebra
(25 min)Joël ATTIA (Université Jean Monnet CNRS, St Étienne)L'étude de la communication acoustique chez les poissons s'est développée au cours des dernières décennies. On sait aujourd'hui qu'il existe chez les poissons une multitude de moyens de production de sons utilisant des organes initialement prévus pour d'autres fonctions (vessie natatoire, dents pharyngiennes, os des nageoires, etc.). Des spécialisations se sont également développées pour améliorer la sensibilité auditive et l'étendue des fréquences perçues. Chez les cichlidés, en particulier chez Maylandia zebra, les dernières études ont mis en lumière l'importance des sons dans la défense du territoire, le choix du partenaire et la reconnaissance spécifique. L'analyse fine des signaux a permis de mettre en évidence des différences de production sonore entre le jour et la nuit portant sur le nombre de sons et le nombre d'impulsions sonores par son.
Suivi et Traçabilité
Bilan et méthodologie du marquage RFID chez Xenopus laevis au CRB Xenopes (cf. réglementation faune sauvage invasive 2018)
(25 min)Brigitte GUILLET (Ex CRB xenope CNRS, Université de Rennes, Rennes)Le marquage de populations animales est un outil indispensable en animalerie: il permet la gestion optimisée du plan d'élevage ainsi que le suivi individuel génétique, sanitaire et comportemental des animaux. Depuis 2018, la réglementation impose le marquage des individus de la faune sauvage avec les PIT Tag RFID. Au CRB Xenopes, après des années de pratique efficace de ce type de marquage en sous cutané, les animaux ont commencé à perdre leur puce. Nous présentons ici les divers protocoles tests qui ont été menés pour trouver la cause de ce rejet. Il a été découvert que le parylène, un revêtement anti-migration enrobant les puces était l'agent déclenchant: c'est un polymère qui induit la formation d'un tissu conjonctif à l'interface tag/tissus environnants, rendant immobile la puce au lieu d'insertion. Ceci conduit à l'augmentation de forces de frottement internes menant à des lésions, points de sortie de la puce. La perte de puce se fait autant chez les mâles que chez les femelles mais avec un temps de latence chez ces dernières. Avec ce constat, nous ne recommandons pas l'utilisation de tags RFID possédant le revêtement parylène pour des marquages en sous cutané chez les animaux xenopes.
Suivi des poissons en milieu naturel par télémétrie et biologging
(25 min)Frédérique BAU (INRAE UR1454 EABX, Cestas)Télémétrie et biologging sont des outils de monitoring privilégiés pour étudier l’écologie des déplacements des espèces. En constante évolution technologique, ils permettent de mesurer à distance leur comportement ainsi que l'environnement dans lequel ils évoluent et la façon dont cet environnement affecte leur état. La présentation illustrera les différentes technologies et méthodologies utilisées en milieu aquatique et les principaux types de marquage associés, avec un focus particulier sur les mesures de raffinement appliquées de la capture au relâcher.
Stress et Bien-être
Résultats d'une étude éthologique sur le comportement du juvénile de seiche (Sepia officinalis) et proposition d'une grille de suivi du bien-être
(25 min)Gaëtan SCHIRES (CRBM, CNRS, Roscoff)Bien qu'inclus depuis 2013 dans la législation relative à l’expérimentation animale, les céphalopodes n'ont pas encore de référentiel spécifique dans l'annexe III et IV.
Si le bien-être est maintenant cadré chez de nombreuses espèces de laboratoire, un référencement clair de la « douleur » et une échelle d’intensité ne sont disponibles que pour quelques espèces aquatiques.
Le travail préliminaire sur les juvéniles de seiche (Sepia officinalis) présenté lors des journées du RESAMA 2022 s'inscrit dans une démarche de construction d'un outil d'évaluation du bien-être chez cette espèce en expérimentation.
Développement de modèles novateurs / non conventionnels pour la recherche sur la régénération, la réponse aux stress et la longévité
(25 min)Aldine Amiel (IRCAN, Inserm, Nice)L’institut de Recherche sur le Cancer & Vieillissement de Nice (IRCAN) étudie les mécanismes moléculaires qui sous-tendent le processus de vieillissement ainsi que les maladies liées à ce processus (ex., cancer) afin de faire avancer notre compréhension fondamentale de ce processus multifactoriel ainsi que de développer de solutions innovantes pour vieillir en bonne santé. Avec la vision que la biologie moderne se doit de développer des modèles de recherche non-conventionnels qui permettent des découvertes majeures, l’IRCAN a mis en place la plateforme ANTIAGE. Il s’agit de la première plateforme d’invertébrés marins au sein d’une faculté de Médecine en France, qui permet aux utilisateurs académiques et privés, d’étudier l’impressionnante résistance aux stress environnementaux, la régénération extrême et la longévité des cnidaires.
Stress des poissons et le cortisol (Sadoul, B., and B. Geffroy. "Measuring cortisol, the major stress hormone in fishes." Journal of Fish Biology, 2019)
(25 min)Benjamin GEFFROY (MARBEC, IRD, Inserm, CNRS, Université Montpellier, Montpellier)Le management du stress chez les poissons est maintenant une préoccupation sociétal majeure, tant dans les élevages à visée scientifique que dans ceux mis en place à des fins aquacoles. Mesurer les niveaux de stress passe par différentes techniques, l'une d'entre elle se focalise sur le cortisol, l'hormone majeure du stress chez les poissons. Ici, nous passons en revue les différentes techniques de mesures et dosages du cortisol, de la plus invasive, à la moins invasive.
Bien-être animal dans les expérimentations de nage forcée chez le poisson-zèbre
(15 min)Chloé EXBRAYAT-HÉRITIER (IGFL, CNRS, Lyon)L'étude de lignées de poissons-zèbre mutantes pour le collagène VI, composant majeur de la matrice extracellulaire dans le muscle, nécessite de réaliser des expérimentations de nage forcée afin d'évaluer les performances natatoires et métaboliques des individus mutants et sauvages. Dans ces expériences de comportement, la prise en compte du bien-être animal est centrale, autant pour assurer le confort de l'animal en cours d'expérimentation, que pour assurer la validité des résultats obtenus.
Présentations courtes Animaleries
Présentation de l’animalerie poissons-zèbre du CIRB, arrivée d’une nouvelle espèce modèle, le Medaka (O. latipes)
(8 min)Marion THAUVIN (Collège de France, Paris)Présentation de l'animalerie aquatique du Centre Interdisciplinaire de Recherche en Biologie (CIRB) hébergée au Collège de France (Paris), qui accueille des poissons-zèbre (Danio rerio). Courte présentation des membres de la plateforme, des équipes utilisatrices et de leurs projets scientifiques, puis des évènements récents ayant permis l'introduction d'une nouvelle espèce au sein de l'animalerie: le médaka (Oryzias latipes). Présentation des nouvelles armoires d'élevage installées en zone conventionnelle.
Présentation de la structure d’élevage Xénope de Watchfrog
(8 min)Gad Styven BOUKOU (Watchfrog, Évry)Il s’agira simplement de présenter la structure d’élevage medaka et xenope de l’animalerie du laboratoire Watchfrog.
Présentation de la Plateforme d’Éthologie Expérimentale de ENES, cichlidés/crocodiliens
(8 min)Nicolas BOYER (Université Jean Monnet CNRS, St Étienne)Outil essentiel du laboratoire ENES la plateforme d’éthologie expérimentale de l’équipe ENES/CRNL de l’université de St Etienne est une structure permettant de mettre à disposition immédiate des équipes de recherche les modèles animaux pouvant être maintenus en captivité dans les espaces dédiés. Polyvalente, cette installation, est équipée de 200m² d’animalerie et 150m² de zone d’expérimentation. Capable d’évoluer aux grés des projets de recherche nous sommes en capacité de maintenir oiseaux, poissons, reptiles et mammifères dans des conditions en adéquations avec les règles d’utilisation d’animaux dans le cadre de recherches scientifiques.
Présentation de la plateforme technologique Xénope de l'Université de Bordeaux: Organisation et projets développés
(8 min)Pierre THIEBAUD (Université de Bordeaux, Bordeaux)La plateforme XenUB est une des neuf plateformes technologiques du Bordeaux Institute of Oncology (https://www.bricbordeaux.com/technologies-et-cellule-de-transfert/). La plateforme dispose d’un espace et des équipements pour l’expérimentation sur l’ovocyte et l’embryon de l’amphibien xénope. Son but est de fournir en interne aux équipes de recherche de l’Université ainsi qu’aux équipes externes la possibilité d’utiliser pour leur projet de recherche le modèle xénope. Ce modèle a contribué dans le passé pour une grande part à nos connaissances en Biologie du Développement. Il est maintenant plus largement employé pour modéliser de manière rapide de très nombreuses pathologies humaines telles que le cancer, les cardiopathies congénitales, les malformations cranio-faciales ou encore les maladies rénales et les ciliopathies. Couplés à l’utilisation de criblage chimique ce modèle constitue un formidable outil pour le développement pharmacologique de substances actives.
Nous développons plusieurs projets dont la modélisation de maladies rares comme Xeroderma pigmentosum ou encore l’albinisme oculo-cutané. Nous avons montré l’intérêt du modèle pour tester des molécules anti-cancéreuses sur le développement neural (Capdevielle et al. (2020) Neuro-Oncology 22 (4) : 550-562) ou la fonction de gènes inhibiteurs de la voie de signalisation WNT (Mosca et al. (2021) Liver Cancer 11 (2) : 126-140).
Bonne Santé
Cadre règlementaire - prise en compte du bien-être des animaux aquatiques lors du transport
(15 min)Virginie BARBIER (DGAL Sous-direction de la santé et du bien-être animal)Lorsqu'il est réalisé dans le cadre d'une activité économique, le transport des animaux vertébrés vivants est réglementé à différents titres, notamment celui de la protection animale.
Le règlement (CE) n°1/2005 relatif à la protection des animaux pendant le transport et les opérations annexes prévoit schématiquement 3 niveaux d'exigences qui se cumulent, depuis les transports de moins de 65 km (obligations de résultats, complétées par des obligations de moyens), en passant par les transports limités à 8h (soumis à autorisation préalable de Type 1 à partir de 65 km, et conditions de qualification des personnels préparant les animaux et conduisant les véhicules), pour aboutir aux transports pouvant excéder 8h (soumis à autorisation de Type 2, ajoutant aux exigences précédentes l'agrément des véhicules, leur traçabilité et des plans d'urgence).
Mycobactéries non tuberculeuses : Comment l’embryon de poisson zèbre nous aide à évaluer la pathogenèse et l’efficacité des thérapies
(25 min)Claire HAMELA (CNRS UMR 9004 - CNRS / UM, IRIM, Montpellier)Les mycobactéries non tuberculeuses (MNT) sont naturellement résistantes à la plupart des antibiotiques et sont très difficiles à éradiquer. Nous utilisons les larves de poisson-zèbre pour étudier la pathogenèse de plusieurs MNT. Nos pratiques dans la manipulation des larves et l’exploitation des données expérimentales ont été optimisées, nous permettant d’évaluer l’efficacité de nouvelles approches thérapeutiques vis-à-vis des infections à MNT.
Surveillance de la santé des poissons en animalerie de recherche : recommandations du groupe de travail FELASA-AALAS
(25 min)Emmanuel LEGUAY (Vetofish, Châteauneuf-les-Martigues)Les premières recommandations sur le suivi de santé des poissons et les mesures de protection viennent d'être publiées par le groupe de travail commun FELASA - AALAS. Cette présentation détaille la notion d'unité épidémiologique (UE), les concepts de SMOP et SLOM, l'analyse de risque, des exemples d'animaleries par des scenarii ainsi qu'un focus sur les 2 documents clés : Health Monitoring Report (HMR) et le descriptif de l'animalerie (UE).
Espèces et Réglementation
Xenopus laevis, espèce invasive en France et dans le monde
(25 min)Jean SECONDI (E2C, Université Lyon 1, CNRS, UMR 5023 – LEHNA, Villeurbanne et Angers)Le Xénope lisse est un amphibien d’Afrique australe largement utilisé dans la recherche. En conséquence de sa large exportation, des introductions répétées ont eu lieu sur plusieurs continents qui ont conduit à créer des populations invasives. L’espèce est considérée comme le troisième amphibien le plus invasif au monde en raison de ses caractéristiques qui génèrent des impacts générés sur les écosystèmes. Le programme life visait à étudier les modalités de contrôle de la population française. Les résultats principaux sont présentés. L’emphase est mise fait sur la nécessité de considérer les procédures de biosécurité pour les installations de recherche ainsi que sur le suivi de l’évolution du règlement européen sur les espèces exotiques envahissantes.
Mise en place d'un élevage de crustacés (Gammaridae) et développement d'outils permettant leur étude
(25 min)Sébastien MOTREUIL (Biogéosciences, CNRS-Université de Bourgogne, Dijon)Un des 3 principaux modèles animaux sauvages étudiés dans l’animalerie du laboratoire Biogéosciences est le modèle Gammaridae, La mise au point de cet élevage et des outils permettant son étude a dû se faire avec deux contraintes majeures :
- des moyens financiers restreints impliquant la recherche de solutions peu couteuses pour leur conception
- très peu d’informations disponibles début 2000 sur le maintien en captivité de cet amphipode, impliquant une mise au point locale.L’étude d’animaux sauvages à Biogéosciences ne s’arrête pas uniquement à ces trois espèces, d’autres seront rapidement abordées lors de cette présentation, afin de donner une vision globale des recherches qui y sont menées.
Rappels réglementaires sur l’utilisation des animaux de la faune sauvage (exemple des amphibiens sauvages)
(25 min)Olivier CALVEZ (SETE, CNRS, Moulis)Dans une société humaine qui change, l’animal a du mal à trouver sa place : nourriture depuis 300 000 ans, de compagnie depuis 15 000 ans (chien et loup), d’élevage depuis 8500 ans, objet d’étude depuis les sociétés d’acclimatation (1854), attraction dans les parcs zoologiques, sujet de passions naturalistes, d’attrait pour l’élevage ou utilisation des produits d’animaux. Aujourd’hui, il n’a plus sa place dans les zoos, dans les cirques, dans les élevages, dans les assiettes et malheureusement dans le milieu « naturel » non plus. A l’aube de la 6ème grande extinction de masse, les espèces de faunes n’ont jamais bénéficiées d’autant de statut de protection qu’actuellement. L’utilisation des animaux au travers de ces différents aspects est régie par tout un ensemble de textes réglementaires international, européen et national. Cette présentation vise à éclaircir les confusions qui peuvent encore exister dans les esprits et poser le cadre dans lequel chacun de nous doit s’insérer lors de ses activités professionnelles et/ou de loisirs. L’herpétofaune (Calotriton des Pyrénées) va accompagner la présentation d’exemples précis et concrets. Nous aborderons le triptyque réglementaire de base à connaître parfaitement, les espèces protégées, l’élevage et l’utilisation d’animaux à des fins scientifiques.
Structures d’hébergement
Présentation structure CEREEP, ENS/CNRS
(15 min)Béatriz DECENCIÈRE & Alexis MILLOT (CEREEP, ENS-CNRS, Nemours)Le Centre de recherche en écologie expérimentale et prédictive, Ecotron IleDeFrance, est une unité de service dédiée à l'expérimentation en écologie terrestre et aquatique, tant avec des modèles animaux que végétaux. A travers cette présentation, nous vous donnerons un bref aperçu de notre unité et de notre travail en expérimentation animale au niveau aquatique.
Présentation des structures de la station d’expérimentation de St Seurin, point non détaillé sur la capture, transport, conservation poissons migrateurs, évolutions à venir pour hébergement (RAS pour les esturgeons et problématiques associées)
(15 min)Patrick CHEVRE (INRAE UR1454 EABX, ISC XPO Saint Seurin sur L’Isle)La station d’expérimentation INRAE de Saint Seurin sur L’Isle est rattachée à l’UR 1454 EABX. On y mène des recherches sur les poissons migrateurs amphihalins et les végétaux aquatiques. Des méthodologies peu invasives sont utilisées pour la capture et le transport des poissons sauvages. Des stocks d’esturgeons sont hébergés pour la restauration de l’espèce endémique Acipenser sturio. Leur conservation en circuit fermé se systématise, avec des contraintes associées à leur long cycle de vie.
Présentation de la plateforme expérimentale de l’unité VIMEP de l’Anses et du LNR maladies réglementées des poissons. Études sur l’évaluation de l’état sanitaire de poissons exposés à différents stress infectieux et chimiques
(15 min)Morgane DANION (VIMEP, ANSES, Plouzané)L’unité « Virologie, IMmunologie et Eco-toxicologie du Poisson » (VIMEP) de l’Anses est localisée sur le Technopôle Brest-Iroise à Plouzané (Finistère). Elle dispose, en complément de ses laboratoires de virologie cellulaire, de biologie moléculaire et d’immunologie, d’installations expérimentales agréées lui permettant de réaliser des contaminations en conditions contrôlées avec des agents biologiques ou physico-chimiques sur poissons d’eau douce ou d’eau de mer. L’unité développe des activités de recherche portant sur deux axes stratégiques principaux, les virus piscicoles et l’éco-toxicologie, à travers un certain nombre de projets au niveau régional, national et international.
Présentation de la Station d’Écologie Théorique et Expérimentale de Moulis SETE, CNRS. Le CNRS de Moulis, 65 ans de recherche originale et remarquable au niveau mondial
(25 min)Olivier GUILLAUME (SETE, CNRS, Moulis)Une unité du CNRS a été implantée en 1948 dans le petit village de Moulis en Ariège. Tout d’abord crée comme un laboratoire souterrain, l’unité dispose alors d’une grotte naturelle aménagée pour la recherche, qui permet entre autre d’accueillir des espèces cavernicoles en élevage pour obtenir l’ensemble de leur cycle de reproduction et d’accroitre le nombre d’individus pour les expérimentations. Dans les années 2000, l’unité s’est développé sur la base d’un projet centré sur l’écologie expérimentale, notamment par la construction de mésocosmes terrestres et aquatiques d’eau douce continentale, auxquels se sont adossés des facilités d’élevage pour invertébrés, poissons, amphibiens et petits reptiles qui permettent de réaliser des mesures en conditions climatiques contrôlées et d’alimenter en organismes les expérimentations aux sein de ces mésocosmes et en milieu naturel. Ces facilités sont accessibles aux chercheurs de l’unité mais aussi à la communauté scientifique internationale.
Raffinement
Validation expérimentale d’un protocole de marquage individuel sur la lamproie de Planer –Lampetra planeri. Application dans le cadre d’une étude comportementale préalable à la restauration de la continuité écologique
(25 min)Alexandre RICHARD (SCIMABIO interfaces, Thonon-les-Bains)Deux séries d’expériences ont été réalisées en milieu contrôlé pour valider expérimentalement et raffiner le protocole d’implantation de marques PIT tag sur des lamproies de Planer prélevées dans le milieu naturel. Les perspectives d’application de ce protocole pour améliorer la gestion des populations sauvages au regard de la continuité écologique seront discutées à travers un exemple d’étude menée dans le Parc Naturel Régional des Vosges du Nord.
Essai pratique de la prise en compte du bien-être animal au quotidien, présentation de la structure et présentation des grilles de scores bien-être sur truite et omble
(15 min)Émilie RÉALIS-DOYELLE (INRAE, Thonon-les-Bains)La structure expérimentale au sol de Thonon-les-Bains est incluse dans la structure OLA qui regroupe 4 types de services. La structure expérimentale au sol permet de multiples expérimentations avec une forte empreinte sur les salmonidés. Cette forte empreinte nous a amenée à développer des essais de grilles prenant en compte le bien-être animal pour les animaux maintenus en élevage (routine) et les animaux en expérimentation.
L’épinoche à trois épines Gasterosteus aculeatus, du laboratoire à la bio-surveillance des milieux
(15 min)Cyril TURIÈS (INERIS Unité d’Écotoxicologie des Substances et des Milieux – ESMI, Verneuil-en-Halatte)Ces dernières années le modèle épinoche a été mis en avant pour sa capacité à être utilisé en laboratoire ainsi qu’en bio-surveillance des milieux aquatiques. Plusieurs utilisations de l’épinoche à trois épines sont abordées dans cette présentation d’un point de vue du raffinement des techniques mais aussi des procédures employées selon le milieu ou les objectifs visés.
Suivi et Marquage
Déplacements et écologie trophique du requin-taupe, méthodologies de suivi de grands requins en milieu naturel et problématiques
(15 min)Sandrine SERRE (UMR LEMAR (CNRS/UBO/IRD/IFREMER), Plouzané)Le projet LAMNA porté par l’APECS (Association pour l’Etude et la Conservation des Sélaciens) en collaboration avec l’UMR LEMAR (UBO/CNRS/IRD/Ifremer). Ce projet porte sur le requin-taupe commun (Lamna nasus, Bonnaterre 1788), une espèce classée vulnérable par l’IUCN et sur laquelle porte un moratoire dans l’Union Européenne. L’objectif d’acquisition de connaissances sur la fréquentation de la zone côtière du Trégor par l’espèce de requin-taupe commun implique le déploiement de balises et la réalisation de prélèvements biologiques sur des femelles de 130 à 250 cm de long pêchée en mer.
Prélèvement d'ADN : frottis cutané vs prélèvement de nageoire pour le bien-être des poissons sauvages, exemple de l’Astyanax mexicanus cavernicole
(15 min)Laurent LEGENDRE (EGCE-IDEEV, CNRS, Gif sur Yvette)La mise au point de la technique du prélèvement d’ADN par écouvillon sur l’Astyanax mexicanus cavernicole a été faite en laboratoire sur un nombre très réduit d’individus en élevage. Cette technique de prélèvement peu invasive est comparée au prélèvement de nageoire pour les aspects de biologie moléculaire, considéré plus invasif. Bien que la quantité d’ADN soit plus faible, ces prélèvements permettent l’extraction d’ADN génomique et de 18 marqueurs moléculaires mitochondriaux. Il s’agit de réduire l’impact sur les populations sauvages étudiées dans le milieu naturel pour lesquelles il est difficile de vérifier l’innocuité du prélèvement de nageoire à posteriori. Cela a permis de mettre en place des expériences de capture/recapture destinées à affiner les estimations de tailles de ces populations naturelles, probablement très réduites en raffinant la pratique de prélèvement d’ADN.
6ème édition des journées RESAMA (2023, Brest)
Céphalopodes
Les céphalopodes : ces mollusques intelligents
(25 min)Anne-Sophie DARMAILLACQ, CREC Université de Caen NormandieLes céphalopodes sont actuellement les seuls organismes invertébrés à figurer dans la directive européenne (2010/63/UE) règlementant l'utilisation d'animaux à des fins scientifiques. Entre 2013 et 2017, l'action COST FA1301 CephsInAction a tenté de répondre à ces nouvelles préoccupations législatives en mobilisant la communauté des chercheurs sur les céphalopodes. Cinq ans après la fin du programme, il en est ressorti un réseau interdisciplinaire de professionnels et d'institutions, plusieurs publications qui synthétisent principalement les connaissances disponibles sur les soins et les procédures appliqués aux céphalopodes, et de nombreuses questions sans réponse. Un travail considérable a été initié pour développer des lignes directrices pour les soins et le bien-être des céphalopodes, mais les recommandations restent largement générales et vagues. Des efforts supplémentaires sont nécessaires pour parvenir à un consensus et à une normalisation. Certains chercheurs ont souligné que le manque de données scientifiques rend difficile la définition de recommandations catégoriques, qui sont donc basées sur une expérience pratique prolongée dans l'élevage réussi de céphalopodes ou sur la « littérature grise ».
Les études sur les céphalopodes n'ont commencé qu'avec l'avènement des stations marines dans la seconde moitié du 19ème siècle. Au cours du 20e siècle, de nombreux travaux ont démontré les étonnantes capacités cognitives des céphalopodes. Il ne fait plus aucun doute que les calmars, les pieuvres et les seiches sont capables d'apprendre et de mémoriser des informations ou d'extraire des ensembles complexes d'informations de leur environnement. Ils peuvent également faire preuve de raisonnement causal et sont capables de prendre des décisions. Dans certains domaines, cette "intelligence mollusque" est comparable à celle des vertébrés (oiseaux et mammifères). Cette présentation propose de passer en revue les résultats marquants de ces dernières années en termes d’intelligence et de sentience chez les céphalopodes.Raffinement en expérimentation chez le juvénile de seiche (Sepia officinalis) : mise au point d'outils d'évaluation du bien-être chez la seiche commune.
(25 min)Gaëtan SCHIRES, CNRS Station biologique de Roscoff, Centre de Ressources Biologiques MarinesLes céphalopodes sont les seuls invertébrés relevant de l'expérimentation animale à l'heure actuelle, malgré de nombreuses études éthologiques, il n’existe pas de référentiel clair pour quantifier l'état de bien être de ces animaux en expérimentation.
Les recherches menées au sein du Centre de Ressources Biologiques Marines de la Station Biologique de Roscoff, en association avec le laboratoire BOREA du Muséum d'Histoire naturelle de Paris, permettent la mise au point d'outils d'évaluation du bien-être chez la seiche commune (Sepia officinalis).
Raffinement
Nouvelle méthode de suivi cinétique sur le bar Dicentrarchus labrax, méthode innovante de biopsie de muscle pour l'analyse d'acides gras
(25 min)Mickaël PERON, UBO LEMARDéveloppement et la validation d'une méthode de biopsie de muscle blanc pour suivre la composition en acides gras chez le bar Européen. Cette méthode non létale s'inscrit dans un contexte de réduction selon la règle des 3R. La biopsie pourrait être appliquée dans plusieurs domaines de recherche afin d'allier réduction et qualité d'échantillonnage.
Chirurgie cardiaque chez le poisson-zèbre Danio rerio : éléments de raffinement
(15 min)Aurélien DROUARD, CNRS IGF, Montpellier : (format 15+5min)Depuis la première démonstration de la capacité de régénération suite à une amputation de l’apex du ventricule cardiaque en 2002, et bien que largement utilisé par la communauté scientifique s’intéressant à ce phénomène, le protocole de résection de l’apex chez le poisson-zèbre classiquement mis en œuvre n’a que très peu évolué. En parallèle, durant ces 20 dernières années, les connaissances sur la perception de la douleur chez les téléostéens, ainsi que la prise de conscience éthique de la nécessité de prise en charge de la souffrance animale ont grandement progressé.
Il apparaît désormais incontournable d’apporter un protocole robuste, éthiquement compatible avec les obligations réglementaires (directive 2010/63/CE, décret 2013-118), impliquant une réelle prise en charge de la douleur lors des interventions chirurgicales via l’utilisation systématique d’analgésiques, mais également en fournissant un environnement et un contrôle des paramètres post-opératoires efficaces, favorisant une récupération optimale des poissons-zèbres.
Un des enjeux majeurs de la mise en œuvre de ce protocole, notamment l’utilisation de molécules analgésiques, doit cependant confirmer l’absence d’interaction avec les mécanismes complexes de la régénération cardiaque déjà démontrés.
Nouvelles espèces
Présentation de l’infrastructure laboratoire de recherche et aquarium public de l’Observatoire Océanologique de Banyuls
(15 min)Pascal ROMANS, Sorbonne Université, Observatoire Océanologique de Banyuls sur MerRésumé non communiqué.
Mise en place d'un élevage d'une espèce de cichlidés (Astatoreochromis alluaudi) : de la conception à la reproduction
(15 min)11h25 - Nathan GIL, ENS Lyon, Institut de Génomique Fonctionnelle de LyonLa présentation retrace tout le chemin que nous avons parcouru pour mettre en place un élevage de cichlidés (espèce Astatoreochromis alluaudi). Il s'agit d'un retour d'expérience, étape par étape, de la conception théorique de l'animalerie à la reproduction de l'espèce élevée. Elle aborde évidemment les problèmes rencontrés propres aux cichlidés mais également les obstacles plus généraux auxquels il faut faire fasse lorsque l'on souhaite mettre en place un nouvel élevage avec une nouvelle espèce. Cette présentation peut être pertinente pour quiconque fait de l'élevage sur modèles aquatiques, du concepteur de projet au technicien animalier.
Mise en place d’un élevage d'une nouvelle espèce : le killifish Nothobranchius furzeri
(15 min)Séverine ETHUIN, CNRS, Restore, ToulouseKillifish ou Notobranchius furzeri est le modèle animal vertébré qui présente une durée de vie la plus courte qui a été décrite à ce jour, soit 6 mois. Ce modèle est particulièrement intéressant pour travailler sur les questions liées au vieillissement, toutefois l’élevage de poissons si spécial revêt de nombreux challenges par rapport à l’élevage du poisson le plus utilisé en recherche, le poisson zèbre. J’aborderai au cours de ma présentation, le suivi de la longévité et du bien être des animaux, des particularités associées à leur alimentation, reproduction et condition d’élevage.
Présentation de l’espèce Amphiprion ocellaris et de sa zootechnie mise en place à l’Observatoire de Banyuls
(15 min)Pascal ROMANS, Sorbonne Université, Observatoire Océanologique de Banyuls sur Mer
Résumé non communiqué.
Utilisation des poissons
Modélisation du vieillissement chez l'African Turquoise Killifish, Nothobranchius furzeri
(25 min)Jean-Philippe PRADERE, INSERM, Restore, ToulouseL'African Turquoise Killifish est un nouveau modèle d'étude du vieillissement puisqu'il a une durée de vie compressée de quelques mois et présente tous les caractéristiques du vieillissement des vertébrés. Depuis 2020, le Turquoise Killifish a été implanté à l'institut RESTORE de Toulouse où de nombreux projets visant à mieux comprendre les raisons de son vieillissement accéléré sont en cours de développement.
Effets des pesticides sur les juvéniles de flet (Platichthys flesus), espèce sentinelle de la qualité des eaux estuariennes
(25 min)Jennifer LAURENT, UBO, IUEM, LEMARL'expérimentation animale présenté vise à évaluer l’impact d’un mélange de pesticides sur le Flet, un poisson plat communément trouvé dans les estuaires.
Le poisson a été exposé pendant un mois à des doses sublétales de pesticides reflétant les concentrations classiquement retrouvées dans un estuaire dont le bassin-versant est soumis à une forte pression agricole.
L’objectif est d’identifier les modifications métaboliques du Flet en réponse à cette exposition aux pesticides. Les résultats obtenus permettront de valider des biomarqueurs dont la dérégulation, chez des poissons prélevés dans la nature, est le signe de la présence de pesticides.
Ce projet permettra donc, à terme, d’améliorer les procédures d’évaluation de la qualité des eaux estuariennesOutils et techniques de biopsie sur les requins : De l'ormeau au requin-taupe
(25 min)Sandrine SERRE, UMR LEMAR (CNRS/UBO/IRD/IFREMER), PlouzanéLe requin-taupe commun, Lamna nasus, est une espèce mobile que l'on retrouve dans les eaux froides. Depuis 2012, les observations rapportées de cette espèce sont en augmentation, en période estivale, à proximité des côtes dans le Trégor-Goëlo (22). Cette augmentation des observations a conduit au montage d'un projet alliant des approches de recherche, de gestion et de sensibilisation. La recherche avait pour objectif de mieux comprendre les dynamiques spatio-temporelles de l'espèce à partir d'individus de requin-taupe commun. L'accès à des individus de requin-taupe commun en milieu naturel est restreint, de ce fait, les prélèvements biologiques réalisés sont raffinés afin d'optimiser l'acquisition de données sur une espèce peu connue. Afin de répondre aux enjeux de connaissance sur cette espèce des analyses des isotopes stables du carbone et de l'azote ont été réalisées sur la base de biopsies de muscle. Les techniques de biopsie en milieu naturel dépendent de la méthode de contentionnement des individus ainsi que de la facilité d'opération en conditions météorologiques variées. Ainsi, les "punch" de biopsie classiquement utilisés et usinés pour cette espèce ont été remplacés par des pistolets à biopsie afin d'assurer le succès et la rapidité des prélèvements quelles que soient les conditions tout en réduisant l'impact sur les animaux.
Approche sanitaire 1
Apports de l'ADN environnemental dans les études épidémiologiques sur la faune sauvage (3Rs) avec la détection et les impacts de la maladie proliférative rénale (MRP ou PKD pour Proliferative Kidney Disease)
(15 min)Eloise DUVAL, Fish-Pass, LailléMise au point d’un protocole de détection non létal du parasite et de son hôte bryozoaire en rivière, et de l'infection parasitaire chez les poissons.
La maladie rénale proliférative (PKD pour proliferative kidney disease), causée par Tetracapsuloides bryosalmonae, est responsable d'importants déclins chez les salmonidés. Comprendre la répartition du parasite dans le milieu et dans ses hôtes semble donc essentiel pour l'élaboration de plans de gestion. Je vous présente un cas d’étude en milieu naturel faisant appel à de nouveaux outils moléculaires.
Développement d'un projet de production de poissons-zèbres Danio rerio à flore contrôlée pour étudier les interactions hôtes-microbes
(15 min)Magalie BOUVET, INRAE IERP UE0907, Jouy-en-JosasDans l’optique de contrôler le statut sanitaire des poisons-zèbres afin de standardiser les protocoles en infectiologie, l’unité INRAe-IERP s’est engagée dans le développement d’un projet de production de poissons-zèbres à flore contrôlée. Ces poisons seront un atout majeur pour l’étude des interactions hôtes-microbiotes dans des contextes infectieux ou non.
Implications vétérinaires dans l'hébergement du modèle Xenopus laevis : contrôle sanitaire, exemple d'un cas clinique
(25 min)Lucile AUBREE, ICM, ParisL’institut du cerveau (ICM) détient des xénopes pour les besoins d’une équipe de recherche. La captivité de ces animaux nécessite une implication d’ordre vétérinaire notamment pour la réalisation du programme de surveillance sanitaire et la gestion des animaux malades.
Développement
Système d'élevage Low Cost : poissons sauvages et de rente, et espèces modèles
(25 min)Emilie REALIS, INRAE CARRTEL, Thonon-les-Bains et Laurent LEGENDRE, CNRS EGCE, Gif-sur-YvetteCette revue est centrée sur 6 articles publiés entre 1999 et 2014 qui démontrent la faisabilité et l'intérêt de développer des systèmes d'élevages lab-made (DIY) et low-cost. Quelques points techniques de ces installations sont détaillés et les coûts sont actualisés en intégrant le taux de change de l'époque et l'inflation jusqu'en 2023. Ceci afin de mieux les comparer entre eux et avec les coûts des systèmes stand-alone que les fabricants professionnels proposent généralement pour nos espèces aquatiques. La discussion tente de cerner les avantages et les inconvénients de ce type de structure pour l'hébergement d'animaux aquatiques modèles ou sauvages. Un dernier article sur un système de distribution d'aliment lab-made est associé à cette revue. Les problématiques des systèmes d'élevage et des paramètres de l'environnement de l'hébergement vis-à-vis des approches 3R sont abordées et discutées dans le cadre du bien-être animal et des différents domaines scientifiques.
Approche sanitaire 2
La flavobactériose en élevage piscicole, avec un focus chez la truite arc en ciel Oncorhynchus mykiss
(25 min)Pierre-Marie BOITARD, Fili@vet, Saint-Martin-des-ChampsLa famille des flavobacteriaceae est l'une des problématiques majeures en élevage piscicole, de part l'importance des problématiques engendrées mais aussi de part l'ubiquité de ces pathogène. Cette famille comprend à la fois des espèces du genre flavobacterium particulièrement problématiques en eau douce mais aussi les bactéries du genre tenacibaculum problématiques en milieu salin. Malgré la grande diversité d'hôtes, d'espèces bactériennes et de milieux, la pathogenicité de cette famille est finalement assez homogène.
Poissons et amphibiens, quelques cas de diagnostic histologique
(15 min)Sophie LABRUT, LABOCEA, Ploufragan
Le diagnostic des maladies chez les poissons font appel à plusieurs techniques combinées dont fait partir l'histopathologie. Cette technique permet d'avoir une vue d'ensemble et d'orienter vers les autres examens complémentaires. Quelques cas rencontrés chez les poissons zèbres, des xénopes.. mais pas que, sont présentés ici.
Bilan du laboratoire national de référence (LNR) - Maladies virales des poissons
(25 min)Lénaïg LOUBOUTIN, ANSES, Unité VIMEP laboratoire de Ploufragan-Plouzané-NiortLe Laboratoire National de Référence (LNR) pour les Maladies réglementées des Poissons réalise des analyses en virologie des poissons. Il intervient dans le cadre de confirmations d'analyses positives en virus réglementés de la Septicémie Hémorragique Virale (vSHV) ou de la Nécrose Hématopoïétique Infectieuse (vNHI), les analyses de première intention étant réalisées par un des 7 laboratoires agréés du réseau. Le LNR a à sa disposition de nombreux outils, basés sur des techniques de virologie cellulaire ou moléculaire, qui lui permettent de cibler un large panel de virus piscicoles, virus réglementés mais également virus émergents potentiellement problématiques pour les filières professionnelles ou pour le milieu naturel.
Apport des techniques d'imagerie in vivo pour mieux comprendre la virémie printanière de la carpe Cyprinus carpio
(15 min)Manon MEHRAZ, INRAE, IERP UE0907, Jouy-en-Josas
Notre projet vise à améliorer les connaissances sur la virémie printanière de la carpe. Dans le contexte des 3R, nous avons développé des techniques d’imagerie in vivo non invasives (raffinement) pour l’étude des interactions hôte-pathogène en poisson zèbre, modèle alternatif à l’expérimentation animale (réduction et remplacement).
Présentations courtes Animaleries
Présentation de la plateforme expérimentale mollusque d’Argenton
(15 min)Hugo KOECHLIN, Ifremer, PHYTNESS, Argenton en LandunvezL’aquaculture est le secteur des productions animales qui s’est développé le plus rapidement ces dernières décennies (désormais on élève, en volume, plus de poissons d’élevage que de bovins), tandis que la question du bien-être animal apparait comme une préoccupation de plus en plus présente dans nos sociétés. L’utilisation des enrichissements est assurément un élément bénéfique dans la pratique de l’élevage piscicole à l’exemple de la truite arc-en-ciel, et les expérimentations menées par la plateforme IBECA, outre le fait d’étudier l’intérêt des enrichissements pour les poissons, s’attachent à proposer et valider des solutions innovantes et peu contraignantes qui peuvent être mises en place aisément sur site de production.
Infrastructures expérimentales Poissons Ifremer Centre Bretagne : espèces de poissons marins et épinoche (Gasterosteus aculeatus)
(15 min)Sophie COLLET, Ifremer, PlouzanéDescription des installations expérimentales Poissons de l'Ifremer Brest. Présentation des thématiques de recherche et des espèces marines utilisées ainsi que le raffinement appliqué dans les structures.
Plateforme IBECA (Ingénierie Bien-Être et Comportement en Aquaculture) : l’enrichissement du milieu d’élevage chez la truite arc-en-ciel Oncorhynchus mykiss
(25 min)Thomas LAFOND, INRAE UR1037 LPGP, Rennes et Thierry KERNEIS, Unité Expérimentale INRAE PEIMA, SizunL’aquaculture est le secteur des productions animales qui s’est développé le plus rapidement ces dernières décennies (désormais on élève, en volume, plus de poissons d’élevage que de bovins), tandis que la question du bien-être animal apparait comme une préoccupation de plus en plus présente dans nos sociétés. L’utilisation des enrichissements est assurément un élément bénéfique dans la pratique de l’élevage piscicole à l’exemple de la truite arc-en-ciel, et les expérimentations menées par la plateforme IBECA, outre le fait d’étudier l’intérêt des enrichissements pour les poissons, s’attachent à proposer et valider des solutions innovantes et peu contraignantes qui peuvent être mises en place aisément sur site de production.
Présentation du projet d'animalerie UPVD : réduction de l'impact environnemental des activités d'une animalerie aquatique
(15 min)Gaël SIMON, UPVD, CEFREM, PerpignanA l’Université de Perpignan (UPVD), plusieurs laboratoires nécessitent la création d’un « établissement utilisateur d’animaux à des fins scientifiques ».
Dans ce cadre, l’UPVD a mis à disposition un local de 100m² et 150k€ pour son aménagement.
La présentation décrit brièvement cette animalerie aquatique et insiste sur les mesures destinées à réduire son impact environnemental.
Notamment l’installation d’une VMC double flux pour réduire la consommation énergétique et l’utilisation de l’acide peracétique comme désinfectant afin de minimiser les rejets polluants.
Ecologie et système d'élevage
Animalerie de l’Institut de la Vision, poisson-zèbre (Danio rerio) et Danionella cerebrum
(15 min)Karine DUROURE, Institut de la Vision / U968 INSERMPrésentation de la plateforme Animalerie Aquatique de l'Institut de la Vision (Paris) : équipements, hébergement et conditions d'élevage, services proposés aux utilisateurs
Structure roussette : travaux d’éthologie sur Scyliorhinus canicula
(15 min)Christelle JOZET-ALVES, Université de CaenLe Centre de Recherche en Environnement Côtier héberge des petites roussettes Scyliorhinus canicula. Afin d’améliorer les conditions d’élevage et de respecter la réglementation, différentes actions ont été récemment menées : 1) rédaction d’une fiche-espèce à destination des utilisateurs ; 2) validation d’une méthode de photo-identification des individus. Ces informations ont pu servir à mener une action concrète d’améliorations des conditions d’élevage avec un suivi comportemental réalisé avant et après une restructuration des groupes, réalisée afin de limiter les interactions agonistiques entre les individus.
Présentation d'un système d'élevage spécifique en éco-toxicologie pour Salmonidés
(15 min)François-Raphael LUBIN, INRAE CARRTEL, Thonon-les-BainsConception et réalisation d'une structure d'élevage à faible cout destinée aux premiers stades de vie de l'omble chevalier (Salvelinus alpinus). Cette structure a été initialement conçue pour la recherche en écotoxicologie mais reste adaptable à de nombreuses questions de recherche et peut accueillir divers organismes.
La sardine, Sardina pilchardus, une nouvelle espèce modèle ?
(25 min)Mathilde BERTRAND, UBO, UMR LEMAR
Actuellement, la sardine européenne (Sardina pilchardus) est une espèce peu utilisée au laboratoire alors qu'il s'agit d'un poisson pélagique aux rôles écologiques, économiques et de santé publique majeurs. En effet, elle occupe une place centrale dans les réseaux trophiques marins, représente une part significative des pêcheries mondiales, et constitue une source importante d'oméga 3 à longue chaîne pour l'homme. Ainsi, cette espèce pourrait-elle devenir un nouvel organisme modèle dans les prochaines années ? Cette présentation abordera différents aspects zootechniques (pêche de sardines sauvages, acclimatation aux structures expérimentales, conditionnement sur le long terme, etc.) et biologiques, propres aux sardines.
Zootechnie et écologie
Maitrise du cycle de production des juvéniles, et verrous rencontrés à l’écloserie de grenouille rieuse domestique RIVAN 92 (Pelophylax ridibundus)
(25 min)Agnès JOLY, SARL Aquaprimeur, Blainville-sur-OrneAquaprimeur a créé en 2020 la première écloserie de grenouilles en Europe. L'espèce élevée est la grenouille rieuse P ridibundus, sélectionnée par l'INRA en 1992 et inscrite sur la liste des animaux domestique en 2006 : la RIVAN92. Agnès JOLY présente le parcours d'élevage de cette espèce depuis la reproduction jusqu'à la grenouillette juste sevrée après la métamorphose. La suite du cycle est effectué par des grossisseurs, qui fournissent les restaurants étoilés, jusqu'à ce jour obligés de servir des cuisses de grenouilles importées. Puis sont évoquées les difficultés zootechniques, en particulier de la reproduction, véritable verrou à ce jour : trop peu d'œufs fécondés par femelle.
Utilisation du zooplancton dans le cadre des études écologiques
(15 min)Loïc PROSNIER, ENES, Université Jean Monnet - Saint-EtienneUne large part de l'expérimentation animale en aquatique se fait sur du zooplancton, soit de manière explicite (comme organismes modèles), soit de manière implicite (comme proie de poisson par exemple). A l'aide d'illustrations variées en écologie, en parasitologie et en écotoxicologie, nous discuterons de la manière dont on doit et on peut considérer les notions de bien-être animal et appliquer les 3C. Sans donner de réponse, l'objectif sera plutôt de questionner la mise en œuvre de l'expérimentation animale sur le zooplancton.
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